dynaaminen BIOSSENSORS Normalisointiratkaisun ohjelmiston käyttöopas

dynamic BIOSENSORS Normalization Solution Software User Guide

dynaaminen-BIOSENTORI-LOGO

dynaaminen BIOSSENSORS Normalisointiratkaisuohjelmisto

dynaaminen-BIOSENSOrit-normalisointi-ratkaisu-ohjelmisto-TUote

Tekniset tiedot

  • Tuotteen nimi: helius
  • Tyyppi: Normalisointiliuos (punainen väriaine)
  • Kohde: RT-IC mittaukset punaisella kanavalla
  • Valmistaja: Dynamic Biosensors GmbH & Inc.
  • Tilausnumero: NOR-Ra
  • Tutkimusta varten Vain käyttöön
  • Säilyvyys: Rajoitettu, tarkista viimeinen käyttöpäivä etiketistä

Herätystehoon vaikuttavat tekijät:

  1. Fluoroforipitoisuus analyyttiliuoksessa
  2. Odotettu sitova signaali
  3. Sirutyyppi

Tarkat ohjeet herätetehosta ja normalisointiliuoksen pitoisuudesta ovat käyttöoppaan taulukossa 2. Huomaa, että optimointia voidaan tarvita yksittäisten järjestelmien perusteella.

UKK

  • K: Kuinka helicity tulisi säilyttää?
    • A: Säilytä heliXcyto käyttöoppaassa annettujen säilytystietojen mukaisesti. Varmista, että tarkistat etiketistä viimeisen käyttöpäivämäärän ja käytä sitä ennen viimeistä käyttöpäivää.
  • K: Voidaanko helicityä käyttää kliinisiin tarkoituksiin?
    • A: Ei, heliXcyto on tarkoitettu vain tutkimuskäyttöön, eikä sitä tule käyttää kliiniseen diagnostiikkaan tai hoitoon.

Tärkeimmät ominaisuudet

  • HelXcyto-sirun Spot 1 ja Spot 2 fluoresoivien signaalien normalisointiin
  • Mahdollistaa punaisten fluoresoivien signaalien oikean reaaliaikaisen viittauksen RT-IC-mittausten aikana
  • Yhteensopiva kaikkien helicity-sirujen kanssa
  • Normalisointiliuos (punainen väriaine) sisältää kohtalaisen hydrofiilisen punaisen väriaineen, jolla on yksi positiivinen nettovaraus

Tuotteen kuvaus

  • Tilausnumero: NOR-Ra

Taulukko 1. Sisältö ja säilytystiedot

Materiaali Korkki Keskittynyt toiminta Määrä Varastointi
Normalisointi ratkaisu-Ra Oranssi 10 uM 6 x 100 µl -20 °C
  • Vain tutkimuskäyttöön.
  • Tällä tuotteella on rajoitettu säilyvyysaika, katso viimeinen käyttöpäivä etiketistä.

Valmistelu

  • Käytä tätä punaisen väriaineen normalisointiliuosta RT-IC-mittauksiin punaisessa kanavassa (analyytistä riippuvainen).
  • Laimenna 10 μM:n normalisointivarastoliuos käyttöpitoisuuteen ajopuskurilla.
  • Normalisointiliuoksen pitoisuuden tulee suunnilleen vastata fluoroforipitoisuutta korkeimmassa mitattavassa analyytin pitoisuudessa.

Tämä voidaan laskea käyttämällä seuraavaa yhtälöä:

  • dynaaminen-BIOSENSOrit-normalisointi-ratkaisu-ohjelmisto-KUVA-1dynaaminen-BIOSENSOrit-normalisointi-ratkaisu-ohjelmisto-KUVA-2: Normalisointiliuoksen pitoisuus halutussa värissä
  • dynaaminen-BIOSENSOrit-normalisointi-ratkaisu-ohjelmisto-KUVA-3: Väriaineen pitoisuus leimatussa analyyttiliuoksessa
  • dynaaminen-BIOSENSOrit-normalisointi-ratkaisu-ohjelmisto-KUVA-4: Suurin mitattava analyytin pitoisuus
  • dynaaminen-BIOSENSOrit-normalisointi-ratkaisu-ohjelmisto-KUVA-5: Merkintäaste (väriaineen suhde analyytiin)

Laimennettuja liuoksia voidaan säilyttää 2-8 °C:ssa enintään 7 päivää.

Sovellus Huomautus

RT-IC-mittauksessa normalisointiliuoksen fluoresoivan signaalin tulee olla samalla alueella kuin korkein sitoutuneesta analyytistä tuleva signaali (raakadata). Absoluuttinen fluoresoiva signaali riippuu normalisointiliuoksen pitoisuudesta ja mittauksessa käytetystä herätetehosta. Herätysteho on valittava seuraavien parametrien perusteella:

  • a. Fluoroforipitoisuus analyyttiliuoksessa:
    • Fluoroforipitoisuus riippuu mittauksessa käytetystä analyytin pitoisuudesta sekä analyytin leimausasteesta. Korkeilla DOL- ja korkeilla analyyttipitoisuuksilla voi olla tarpeen alentaa herätetehoa.
  • b. Odotettu sidossignaali:
    • Voimakkaasti ilmentyneet kohteet solussa voivat sitoa useampia leimatun analyytin molekyylejä. Erittäin yli-ilmentyneiden kohteiden tapauksessa voidaan odottaa vahvaa sitoutumissignaalia. Välttääksesi sulkimen sulkeutumisen, viritystehon alentamista voidaan harkita.
  • c. Sirun tyyppi:
    • Eri sirutyypeillä on erilaiset fluoresoivat taustat. Mitä suurempia ansoja on ja mitä enemmän ansoja sirulla on, sitä korkeampi taustasignaali. Siksi L5-sirut saattavat vaatia pienempää herätetehoa kuin M5-sirut.

Herätystehon ja normin lähtöpisteeksi. RT-IC-kokeessa käytettävä liuoskonsentraatio, katso taulukko 2. Taulukko 2. Fluoroforipitoisuuden, normalisointiliuoskonsentraation ja heliXcyto M5 -sirulle sopivan viritystehon suhde

Analyyttiväriaine kons. = analyytin miinukset x DOL Herätysvoima Pitoisuuden normalisointiliuos Laimennus Normalisointiliuos
25 nM 0.5 25 nM 1:400
50 nM 0.3 50 nM 1:200
100 nM 0.2 100 nM 1:100
300 nM 0.1 300 nM 1:33
500 nM 0.08 500 nM 1:20
1 uM 0.05 1 uM 1:10
2.5 uM 0.02 2.5 uM 1:4

Huomautus: Tämä taulukko on tarkoitettu sinulle ohjeeksi. Heliteettiin tallennettu lopullinen signaali riippuu kuitenkin monista tekijöistä. Näin ollen jokaisessa järjestelmässä tarvitaan jonkin verran optimointia.

Ota yhteyttä

Asiakirjat / Resurssit

PDF thumbnailNormalisointiratkaisuohjelmisto
User Guide · NOR-Ra, Normalization Solution Software, Solution Software, Software

Viitteet

Esitä kysymys

Use this section to ask about setup, compatibility, troubleshooting, or anything missing from this manual.

Esitä kysymys

Ask a question about setup, compatibility, troubleshooting, or anything missing from this manual.